Система забору крові для неінвазивного пренатального тестування (NIPT), моніторингу терапії у пацієнтів з онкологією та контролю відторгнення трансплантата

S-Monovette^® cfDNA Exact для позаклітинної ДНК

S-Monovette^® cfDNA Exact — для неінвазивного пренатального тестування (NIPT, генетичний матеріал плода (його ДНК) у венозній крові матері), молекулярної характеризації та моніторингу терапії у пацієнтів з онкологією, а також моніторингу відторгнення трансплантата після трансплантації органів.

ДНК в основному локалізована в ядрах клітин, проте дуже невелика кількість ДНК також міститься в системі кровообігу (у безклітинному та фрагментованому вигляді в плазмі крові). Ця позаклітинна ДНК зазвичай є продуктом розпаду загиблих клітин.

Аналіз позаклітинної ДНК вже відіграє певну роль під час проведення неінвазивних пренатальних тестів (NIPT), оскільки позаклітинна ДНК ембріона може безперешкодно проходити через плаценту й тому може бути виявлена у крові матері.

Якщо позаклітинна ДНК утворилася зі змертвілих пухлинних клітин («циркулюючої пухлинної ДНК», ctDNA), ця позаклітинна ДНК (або ctDNA) також може використовуватися для визначення мутацій, що лежать в основі онкологічного захворювання.

Такий аналіз крові також називають рідинною біопсією. Крім пункції за допомогою голки, рідинна біопсія представляє собою неінвазивний метод, що дозволяє як розширити онкологічні дослідження (групи, які можуть пройти стандартні процедури біопсії), так і поліпшити лікування пухлини з урахуванням індивідуальної специфіки.

Крім того, у спеціальній літературі вже визначено підходи до використання позаклітинної ДНК, як індикатора патогенних інфекцій або виявлення нейродегенеративних, аутоімунних та серцево-судинних захворювань.

Щоб позаклітинну ДНК можна було використовувати для аналізу, її концентрація у зразку не повинна бути надто низькою. Оскільки окремі клітини, присутні в пробі крові, швидко починають гинути та вивільняють геномну ДНК, вихідна частина позаклітинної ДНК зразка швидко розбавляється. Тому необхідно запобігти вивільненню геномної ДНК на період зберігання та транспортування проби крові.

S-Monovette^® cfDNA Exact містить інноваційний реагент (наповнювач), який використовується для негайної стабілізації позаклітинної ДНК, присутньою в крові (відбуваються процеси запобігання її деградації та вивільнення геномної ДНК з клітин, які містять ядро).

У S-Monovette^® cfDNA Exact можна відокремити плазму за допомогою центрифугування. Використання S-Monovette^® cfDNA Exact стандартизує преаналітику в закритій системі під час зберігання та транспортування зразка.

Після виділення позаклітинної ДНК, стабілізованої за допомогою S-Monovette^® cfDNA Exact, вона сумісна з усіма аналітичними методами (наприклад, секвенування нового покоління та ПЛР).

S-Monovette^® cfDNA Exact призначений для забору венозної крові аспіраційним або вакуумним методом. Об'єм зразка становить 9,2 мл (з них — 8,4 мл крові).

Гемоліз є мірою клітинного стресу й свідчить про руйнування клітин крові під час забору проби. Лізис клітин крові під час відбору зразків має прямий вплив на вивільнення геномної ДНК у пробу крові клітинами, які містять ядро.

Раніше науковцями було доведено, що гемоліз in-vitro може бути пов'язаний з підвищеним рівнем позаклітинної ДНК у плазмі, отриманої з геномної ДНК з клітин, зруйнованих під час відбору проб (El Messaoudi S, Rolet F, Mouliere F, Thierry AR. Circulating cell free DNA: Preanalytical considerations. Clin Chim Acta. 2013; 424: 222-30. https://doi.org/10.1016/j.cca.2013.05.022 ). Тому для всіх наступних аналізів позаклітинної ДНК важливо уникати будь-якої форми гемолізу. Щадна аспіраційна техніка, яка доступна при використанні S-Monovette^® cfDNA Exact гарантує високу якість зразка (чим менше клітин руйнується, тим менше геномної ДНК вивільняється з клітин у плазму). Кришка, що загвинчується, забезпечує додатковий захист, запобігаючи аерозольного ефекту при відкритті.